当前GMP车间器具的清洗分为人工清洗和器具清洗机清洗;在生物制品领域器具清洗机引入较早，尤其是生物制药和疫苗制品企业;本文重点讲解器具清洗机的清洁验证之一的喷淋覆盖率测试方案。

确认清洗机装载一、装载二的满载喷淋效果是否能够实现全覆盖。

方法

准备：选用Poseidon 1200器具清洗机，准备篮架装载一和篮架装载二，以及核黄素、紫光灯和喷雾器。

2.取1L烧杯，注入1L纯化水，然后将200mg核黄素放入水中，溶解成200mg/L的核黄素溶液。

3.将核黄素溶液放入喷雾器中，将满载的篮架推入腔体，核黄素溶液均匀地喷涂在待清洗器具的内外表面，清洗架和清洗机内腔的表面的每个部位。

4.使用紫光灯照射待清洗器具的内外表面、清洗架以及清洗机内腔的外表面，以确认核黄素溶液的喷涂效果。

5. 将喷涂过核黄素的清洗架亟待清洗器具推入内腔中，

装载一设定清洗程序： 预洗75度1分钟，漂洗一75度1分钟，漂洗二75度1分钟，保存程序。

装载二设定清洗程序：预洗75度1分钟，主洗75度5分钟，冲洗75度1分钟，漂洗一75度1分钟，漂洗二75度1分钟，保存程序。(通常湿润状态的核黄素才会在紫外灯下显现荧光，所以不涉及烘干程序)

6.清洗流程结束后，需再次使用紫光灯全面照射待清洗器具的内外表面、清洗架、清洗机内腔的外表面，以及各管路死角和喷淋球表面，以确认清洗效果。

7. 按照上述步骤，分别对两个装载进行操作。操作完成后，需打印记录条作为附件，并在附件上明确标注‘SAT文件’，同时附上签名、日期及页码信息。

验收标准

1.核黄素需均匀喷涂至待清洗器具的内外表面，清洗架和清洗机内腔的外表面的每个部位。

2.清洗结束后，经紫光灯照射，无荧光现象。

3.测试后的附件已附加到测试结果中。

总结：

在清洗验证中，核黄素喷淋覆盖率测试具有以下核心优势：

1. 直观可视化覆盖效果

通过核黄素在365nm紫外灯下的黄绿色荧光反应，可清晰识别喷淋球覆盖的完整区域，快速定位死角或未润湿部位。这种可视化检测避免了传统目视检查的主观性，显著提升问题定位精度。

2. 优化清洗工艺参数

覆盖率测试可验证喷淋压力、流量等参数的合理性。一旦发现覆盖存在不足，我们可采取调整喷淋球位置、提升旋转速度以及优化管路设计等策略加以改进，进而有效减轻后续清洁验证的工作负担。例如，切线出水清洗球通过涡流设计提升覆盖效率，核黄素测试可验证其实际效果。

3. 降低交叉污染风险

确保喷淋装置实现全面覆盖，是遏制残留物积聚的核心所在。通过核黄素测试，我们能够精准识别罐体管口、搅拌桨等高风险区域的覆盖死角，从而有效避免不同批次产品间的交叉污染，严格遵循GMP对清洁验证的既定要求。

4. 支持合规性证明

核黄素法被广泛认可为清洁验证的替代方法(如PDA TR29)，其测试结果可作为法规审计的依据。例如，注射用水储罐的喷淋覆盖率测试直接关联微生物控制要求，确保储罐内壁湿度均匀且无腐蚀风险。

5. 简化验证流程

与TOC或微生物残留检测相比，核黄素法无需依赖复杂精密的仪器，其操作流程简便快捷，且成本相对较低。喷洒后可直接进行清洗循环，通过紫外灯快速判断结果，缩短验证周期。